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高效液相色譜日常維護要點-沖洗

更新時間:2022-05-31 點擊次數(shù):3791
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哈嘍哈嘍大家好,小編又來了。之前小編已經帶大家詳細了解了脫氣和過濾的基本原理和一些日常處理方法,今天就帶大家來了解一下高效液相色譜日常維護最后一個要點-沖洗。

相信各位老師一定深有感觸,要使HPLC系統(tǒng)能夠良好運行的第三個要點是保持液相系統(tǒng)的清潔。日常使用時,我們需要關注流動相流經該系統(tǒng)的所有地方,一般都是建議對儲液瓶,泵,自動進樣器,色譜柱,檢測器這些地方做經常性的沖洗,這樣將會使你的系統(tǒng)隨時保持最佳狀態(tài)。


01 儲液瓶

首先流動相應根據(jù)用量合理配置,建議最好是現(xiàn)配現(xiàn)用。其次的話要經常清洗流動相儲液瓶,最好是更換一次流動相沖洗一次儲液瓶。

我們又可以分為幾種不同沖洗方式。

一般清洗:直接用純化水沖洗。適用于盛裝純甲醇、純乙腈的貯存。

正常清洗:加入適量洗潔精,用毛刷刷洗;之后用純化水沖洗干凈。

干凈的標準:水不成股流下,也不掛壁。適用于盛裝含有緩沖鹽或無機酸等流動相的貯存瓶。

重點清洗:先用稀硝酸或鉻酸洗液潤洗,再用正常清洗項下的方法清洗。適用于有可能長霉的貯存瓶清洗,如夏天存放含大比例無機相的瓶子,以及存放流動相時間超過15天的瓶子。

清洗干凈標準除正常清洗項下規(guī)定外,同時用pH試紙測定,使其達到中性(純化水的pH值)。一定要保證最后的瓶子流出的水為中性,否則可能會對液相色譜儀或色譜柱造成損壞。

02 泵

接下來要沖洗的是泵。特別是當流動相中含有難揮發(fā)的緩沖液(如磷酸鹽)時。如果儀器不是連續(xù)使用,當流動相蒸發(fā)時, 難揮發(fā)物就會粘在活塞密封墊的表面,難揮發(fā)物將形成固形物沉淀。這是泵密封墊磨損和單向閥滲漏的主要原因之一。

所以,無論使用長短,在停泵以前一定要用非緩沖液流動相沖洗泵在半個小時以上,要是流動相中有難揮發(fā)緩沖鹽則建議沖洗的時間應該更長些。

03 管路

針對管路的沖洗,如果以常規(guī)有機相試劑作為流動相的系統(tǒng),建議每次實驗完成后,用高比例有機相沖洗系統(tǒng)90分鐘以上(90%的甲醇水溶液,或者用90%乙腈水溶液)。

如果流動相中含有酸堿鹽的的系統(tǒng),建議先斷開保護柱和色譜柱,用純水沖洗泵和進樣器管路30分鐘(流速1.0mL/min),沖洗過程中應保證進樣器分別在load和inject狀態(tài)各沖洗15min,之后應進行過渡,首先用高比例水相(10%甲醇水溶液,或者用50%乙腈水溶液)過渡系統(tǒng)90分鐘,之后再用常規(guī)有機相試劑作為流動相系統(tǒng)方法沖洗。


04 自動進樣器

自動進樣器也要按規(guī)定清洗?,F(xiàn)在的儀器多配有自動進樣器的沖洗液瓶,通常只要注意及時更換、補充沖洗液即可。

05 色譜柱

色譜柱的污染也會隨使用時間而增加。通常表現(xiàn)是:色譜柱壓升高,峰形異常,柱效下降,分離度異常等。

預防這個問題的zui有效方法:在每一批樣品分析結束后或準備卸下柱子時,將我們的色譜柱按照對應的說明書做好日常維護工作。


06 檢測器

針對檢測器的沖洗,可以依據(jù)檢測器其性質并按照說明書規(guī)定進行洗。例如UV/VIS檢測器或FL檢測器,在對柱子和系統(tǒng)進行沖洗時也就一同對檢測器流通池中污染物進行了清洗。但是蒸發(fā)光檢測器或質譜儀則需要按照說明書進行定期清洗。這些檢測器在使用時會有難揮發(fā)污染物沉積,如質譜儀離子源的噴針、毛細管、錐孔板、預四極等部件,因而需要定期清洗。

到此,針對高效液相色譜日常維護要點就給大家介紹的差不到了,如果想要實驗室日常使用的液相色譜儀能夠正常高效的運行,以上日常維護都是必bu可少的。



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